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產(chǎn)品說明
該酶來源于嗜熱細菌，為 E. coli 核酸內(nèi)切酶 III的同源蛋白，具有很好的熱穩(wěn)定性。既有 N-糖苷水解酶活性也有AP-裂解酶活性。N-糖苷水解酶活性可釋放雙鏈 DNA 上發(fā)生氧化受損的嘧啶堿基，產(chǎn)生一個脫嘧啶（AP）位點。AP-裂解酶活性隨后對該位點進行切割。Tma 核酸內(nèi)切酶 III 識別 DNA 上的無堿基位點、5,6 二羥基胸腺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇等DNA損傷。
本公司Tma 核酸內(nèi)切酶 III是重組表達，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。
活性定義
1活性單位指在65℃下， 1×Tma 核酸內(nèi)切酶 III反應(yīng)緩沖體系下，1 小時能切割 1 pmole 含一個 AP 位點的 60 mer 寡核苷酸雙鏈所需的酶量。
活性測定條件
1× AM Buffer E： 20 mM Tris-HCl（pH 8.8），10 mM KCl ，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100，65℃ 溫育。
濃度：10U/μl
保存條件：-20℃可保存2年，避免反復(fù)凍融
特點與應(yīng)用
? 熱穩(wěn)定性酶，可以在高溫下進行DNA修復(fù)反應(yīng)
? 單細胞凝膠電泳（彗星試驗）
? 損傷DNA修復(fù)
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1108A | AE1108B |
Tma 核酸內(nèi)切酶 III | 500U | 2500U |
10×AM Buffer E | 0.2ml | 1.0ml |
質(zhì)量控制
經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl（pH 8.0），10 mM EDTA，100 mM NaCl，5mM DTT。
相關(guān)產(chǎn)品
AE1101：EcUDG
使用實例：
1）按下表配制反應(yīng)體系
反應(yīng)組分 | 體積或濃度 |
10×Buffer | 2μl |
底物DNA | 5-10pmole |
Endonuclease III (10U/μl) | 1μl |
H2O | Variable |
總體積 | 20μl |
2）50-65℃×60min反應(yīng)，
3）尿素變性PAGE電泳檢測酶切產(chǎn)物，或按實驗?zāi)康倪M行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應(yīng)用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 本酶不同于內(nèi)切核酸酶IV，切斷AP位點后，斷裂位點的3’末端為磷酸基團，不能夠被DNA聚合酶延伸。
l AP裂解酶活性產(chǎn)生的3’末端磷酸基團可以利用內(nèi)切核酸酶IV去除，生成3’-OH，由DNA聚合酶進行延伸反應(yīng)
