產品說明
本產品是針對多重PCR,專門研發的抗體法熱啟動Multiplex PCR試劑盒。試劑盒所用Taq酶為新一代熱啟動Taq DNA聚合酶,大大提高了模板-引物DNA的結合力,從而使擴增特異性和擴增產量得到顯著提升。多重PCR緩沖體系經專門優化,可兼容寬泛的產物GC含量、引物Tm值,同時亦可兼容全血、血卡等樣本直擴,無需額外優化,即可在60℃通用退火溫度下完成大多數多重PCR檢測。
本試劑盒的熱啟動Taq聚合酶搭配專門優化的PCR Buffer,極大地提高了PCR的擴增效率,使同一個PCR反應體系中所有的引物都能得到高效延伸,無需額外優化;同時PCR擴增偏好性很低,對不同類型的引物和模板擴增效率一致性高,在獲得極高產量的同時保持良好的多重片段擴增均一性和特異性,可以有效減少由引物錯配引起的非特異性擴增。
產品組成
組 分 | AK0101A(200次/20μl) | AK0101B(1000次/20μl) |
2×Multiplex Buffer (High specificity) | 2 × 1 ml | 10.0 ml |
Multiplex Taq DNA Polymerase (5 U/μl) | 80 μl | 400 μl |
保存
-30至-20℃保存,-20度至4℃運輸
產品特點
高均一性:所有的引物都能得到高效延伸;對不同類型的引物和模板擴增效率一致;
高特異性:有效減少由引物錯配引起的非特異性擴增;
高產量:在各種體系中,擴增產物產量很高;
良好兼容性:兼容不同GC含量(25%-75%)擴增片段,兼容不同Tm值的引物。
適用范圍
多重PCR擴增;MLPA(multiplex ligation probe amplification)擴增;病原體的多重PCR檢測和分型;分子雜交檢測等。
測和分型;分子雜交檢測等。
注意事項
1. 引物設計對于多重PCR擴增的成功與否至關重要。首先,引物設計需要滿足常規的引物設計規則,避免出現非特異性擴增和無法擴增。同時,應逐一PCR驗證設計好的引物對,選擇效果較好的引物對用于多重PCR擴增。推薦使用PAGE純化的高質量引物。
2. 用于多重PCR擴增,推薦目標片段不超過3,000 bp。
3. 推薦每條引物終濃度為0.2 μM。由于不同批次合成的引物產量有差異,在新合成的引物使用前,應先通過PCR對其真實濃度進行校準。如某些目標片段擴增產量偏低,可適度提高對應引物用量,以提高該片段擴增產量。
4. 擴增產量低時,可適當提高引物濃度;發生非特異性擴增時,可適當降低引物濃度。