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海洋細(xì)菌SSB是細(xì)菌DNA復(fù)制必需的一種單鏈DNA（ssDNA）結(jié)合蛋白，結(jié)合并穩(wěn)定瞬時形成的ssDNA區(qū)域，在DNA 復(fù)制過程中維持ssDNA結(jié)構(gòu)。SSB可以提高RT-PCR中反轉(zhuǎn)錄的效率、促進(jìn)限制性內(nèi)切酶的消化反應(yīng)、增強(qiáng)DNA 聚合酶的活性、提高PCR 產(chǎn)量與擴(kuò)增特異性、減少引物二聚體形成。
本公司海洋細(xì)菌SSB 是重組表達(dá)，多步純化的重組蛋白。具有ssDNA結(jié)合能力強(qiáng)，抑制引物二聚體形成活性高。
活性定義
本品按純蛋白質(zhì)量濃度銷售。
濃度：2mg/ml
保存條件：-20℃保存
特點
? 在 RT-PCR 過程中，增加反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力；
? PCR 時，增加目的片段的產(chǎn)量和特異性；
? 穩(wěn)定和標(biāo)記 ssDNA 結(jié)構(gòu)；
? 適用于所有PCR buffer、等溫核酸擴(kuò)增buffer；
? 熱失活：65℃ 加熱 20 分鐘。
適用范圍
? 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)、PCR；
? 體外轉(zhuǎn)錄；
? 其它需要結(jié)合ssDNA的實驗。
? 電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)的DNA結(jié)構(gòu)
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1910A | AE1910B | AE1910C |
海洋細(xì)菌 SSB | 0.2mg | 1mg | 4mg |
質(zhì)量控制
相關(guān)測試表明無外源內(nèi)切、外切脫氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA。
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，0.5 mM DTT，1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 8 @ 25°C。
使用實例：
1、降低PCR的引物二聚體
1）在冰上按下表配制反應(yīng)體系
反應(yīng)組分 | 體積或濃度 |
10×PCR Buffer | 5ul |
T4 SSB | 1-2ul |
引物-F（10uM） | 1.5 |
引物-R（10uM） | 1.5 |
DNA template | 10-100ng |
Taq酶(5U/μl) | 0.5ul |
H2O | Y ul |
總體積 | 50ul |
2）PCR反應(yīng)，
3）瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物，或按實驗?zāi)康倪M(jìn)行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應(yīng)用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 65℃加熱20分鐘可以完全失活。
l 反轉(zhuǎn)錄實驗應(yīng)該遵守RNA操作規(guī)則，并添加RNase Inhibitor。
