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產(chǎn)品說明
DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)（MMR）主要由三種蛋白組成，包括MutS、MutL和MutH。其中MutS負(fù)責(zé)識別錯(cuò)配或未結(jié)合位點(diǎn)并與之結(jié)合，隨后MutL蛋白與MutS-DNA形成復(fù)合體，增強(qiáng)其穩(wěn)定性，并激活MutH的內(nèi)切酶活性，協(xié)同解旋酶和單鏈結(jié)合蛋白將錯(cuò)配序列切除。 TthMutS蛋白是一種分離自嗜熱棲熱菌（Thermus thermophilus）的DNA錯(cuò)配修復(fù)蛋白，在最適溫度 65-75℃ 范圍內(nèi)，該蛋白具有依賴于DNA的ATPase 活性。 TthMutS蛋白在DNA復(fù)制中識別錯(cuò)配堿基和插入堿基形成的Loop結(jié)構(gòu)，其緊密結(jié)合Loop結(jié)構(gòu)從而阻止聚合酶的延伸。因此，其可用于錯(cuò)配PCR反應(yīng)（ARMS-PCR）和基因芯片中，除此外，在基因合成中能阻止錯(cuò)配的產(chǎn)生，降低基因突變率。MutS結(jié)合錯(cuò)配堿基對的能力是正確配對堿基對的10-20倍，其中對G/T錯(cuò)配的結(jié)合能力最強(qiáng)。
本公司Tth MutS蛋白是在大腸桿菌中重組表達(dá)，并親和純化的重組大腸桿菌。
濃度：0.5ug/μl
保存條件：-20℃可保存2年，避免反復(fù)凍融
特點(diǎn)和適用范圍
? 熱穩(wěn)定性MutS，適合高溫下的錯(cuò)配DNA聚合酶反應(yīng)
? 去除PCR產(chǎn)物中的錯(cuò)配DNA
? 錯(cuò)配DNA檢測/SNP檢測
? 錯(cuò)配DNA富集實(shí)驗(yàn)，去除野生型DNA
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1182A | AE1182B |
Tth MutS蛋白 | 100ug | 500ug |
10×Tth MutS Buffer | 0.5ml | 1.0ml×2 |
質(zhì)量控制
經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
20mM Tris-HCl，pH7.5，100mM NaCl，1mM DTT，50%甘油
相關(guān)產(chǎn)品：
AE1181：Tth mutL
使用實(shí)例：
1、錯(cuò)配DNA結(jié)合實(shí)驗(yàn)
1）按下表配制反應(yīng)體系
反應(yīng)組分 | 體積/ul |
10×Buffer | 2 |
底物：錯(cuò)配雙鏈DNA | 1-2pmole |
TthMutS (0.5ug/μl) | 1-2 |
H2O | Variable |
總體積 | 20 |
2）37℃×10min反應(yīng)，
3）非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測DNA結(jié)合結(jié)果，或按實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實(shí)驗(yàn)使用，臨床應(yīng)用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項(xiàng)
l 需要用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測DNA結(jié)合結(jié)果
l 適合高溫下的DNA錯(cuò)配堿基對結(jié)合反應(yīng)，但要確保雙鏈DNA的穩(wěn)定存在
l mutL的加入對MutS的錯(cuò)配DNA結(jié)合活性有一定促進(jìn)作用
