產品說明
DNA錯配修復系統(MMR)主要由三種蛋白組成,包括MutS、MutL和MutH。其中MutS負責識別錯配或未結合位點并與之結合,隨后MutL蛋白與MutS-DNA形成復合體,增強其穩定性,并激活MutH的內切酶活性,協同解旋酶和單鏈結合蛋白將錯配序列切除。ttMutL蛋白是一種分離自嗜熱棲熱菌(Thermus thermophilus)的DNA錯配修復蛋白,它在最適溫度 65-75℃ 范圍內,具有依賴于DNA的ATPase 活性,在DNA錯配修復中能夠介導MutS和UvrD發揮作用,因此其在錯配修復中發揮重要作用。
本公司Tth MutL蛋白是重組表達,并經多步純化制備的重組蛋白。
濃度:0.5ug/μl
保存條件:-20℃可保存2年,避免反復凍融
特點與應用
l 與Tth MutS一起進行錯配DNA結合實驗
l 與Tth MutS一起進行錯配DNA富集實驗
l 與Tth MutS一起進行錯配DNA切割實驗
產品包裝規格及組成
Component | AE1181A | AE1181B |
Tth MutL蛋白 | 0.1mg | 0.5mg |
10×Tth MutL Buffer | 0.5ml | 1.0ml×2 |
質量控制
經過嚴格的質控檢測,確保該產品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
20mM Tris-HCl,200mM NaCl,5mM DTT,50%甘油,pH7.5
使用實例:
1)按下表配制反應體系
反應組分 | 體積或濃度 |
10×Buffer | 3ul |
底物:錯配雙鏈DNA | 1-2pmole |
MutL (0.5ug/μl) | 1-2ul |
MutS (0.5ug/μl) | 1-2ul |
H2O | 補水到20ul |
總體積 | 30ul |
2)60℃×10min反應,
3)非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測DNA結合結果,或按實驗目的進行后續操作。
警告: 本產品僅限科研實驗使用,臨床應用安全性和有效性未鑒定,不可用于醫療臨床診斷。
注意事項
l MutL的內切酶活性較低
l 本酶與EcMutS配合使用可增強錯配堿基對結合力
l 本酶為耐熱蛋白,最適反應溫度為50-70度,徹底失活需要苯酚抽提