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產品說明
RecJ核酸酶作用于單鏈DNA，沿 5′ →3′ 方向水解DNA，生成5’-磷酸的單鏈DNA和單核苷酸。細菌RecJ還能夠水解5’-脫氧核糖磷酸（5’-deoxyribose phosphate）基團的活性，促進簡介切除修復過程。當底物為 5′ 端突出了 22 個核苷酸的雙鏈DNA時，經RecJ酶切后，可得到以下三種5′末端的DNA混合產物：5′平齊末端、5′ 突出末端（1-5 個核苷酸）和5′ 凹陷末端（1-8 個核苷酸）。RecJ水解單鏈DNA時無需ssDNA的5′ 末端磷酸化。
本公司大腸桿菌RecJ nuclease是重組表達的麥芽糖結合蛋白（MBP）融合蛋白，并經多步純化的重組酶。MBP標簽增強了 RecJ的溶解度，但對RecJ核酸酶活性沒有影響。
活性定義
1單位指在溫度為37℃，AM Buffer B緩沖體系下，30 min內水解單鏈DNA產生0.05 nmol溶于三氯乙酸的脫氧核糖核酸所需的酶量。
活性測定條件
AM buffer B，37℃ 溫育。
濃度：30U/μl
保存條件：-20℃保存
特點
? 特異性 5′ →3′ 單鏈DNA核酸外切活性
? 首選底物是帶有5'單鏈（長于6個核苷酸）的雙鏈DNA
? 熱失活：65℃×20 min
適用范圍
? 從5′ →3′方向降解單鏈DNA
? 去除線性雙鏈DNA的5'突出的單鏈末端（可能產生3種末端：5′平齊末端、1-5 個核苷酸的5′ 突出末端、1-8 個核苷酸5′ 凹陷末端）
產品包裝規格及組成
Component | AE2201A | AE2201B |
RecJ nuclease（5' to 3’） | 1kU | 5kU |
AM Buffer B | 0.2ml | 1.0ml |
質量控制
相關測試表明無外源內切、外切脫氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA。
酶貯存緩沖液
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 μg/ml BSA，50% Glycerol ，pH 7.4 @ 25°C。
相關產品
AE2202：Exonuclease I；AE2106:耐熱RecJ nuclease（3' to 5’）
應用實例
1. 酶切反應
1）按下表配制反應體系
反應組分 | 體積/ul |
10× Buffer | 5 |
DNA | 1ug |
EcRecJ nuclease（5' to 3’）(30U/μl) | 1 |
H2O | variable |
總體積 | 50 |
2) 37°C反應30min；
3) 65°C加熱20min，使酶失活
4) 電泳檢測單鏈DNA水解結果。
警告: 本產品僅限科研實驗使用，臨床應用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫療臨床診斷。
注意事項
l 本酶在AM Buffer B中也具有活性，且添加Mn2+可以提高活性
l 相比Mg2+，Mn2+對酶活性有顯著促進作用
l 本酶不降解平末端雙鏈DNA
