咨詢熱線：
400-660-9586
產(chǎn)品說明
T7 核酸內(nèi)切酶I識別并切割不完全配對 DNA、十字型結構DNA、Holliday結構或交叉DNA、異源雙鏈DNA或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈DNA。該酶切割錯配堿基5′端的第一、第二或第三個磷酸二酯鍵。
本公司T7 核酸內(nèi)切酶 I是重組表達，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。
活性定義
1活性單位指在37℃下， 10×T7核酸內(nèi)切酶I反應緩沖體系下，1小時將90%以上的1 μg超螺旋十字型結構的pUC（AT）* 轉(zhuǎn)化成 90% 以上的線性結構所需要的酶量。
活性測定條件
1×AM Buffer B：50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2 ，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃），37℃ 溫育。
濃度：10U/μl
保存條件：-20℃可保存2年，避免反復凍融
特點及應用
? 識別錯配 DNA
? 分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA
? 檢測或切割異源二聚體 DNA 和切刻 DNA
? 隨機切割線性 DNA 進行 shot-gun 克隆
? 基因突變、SNP、TALEN 或 CRISPR/Cas9 形成的突變 體檢測
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE2401A | AE2401B |
T7 endonuclease I | 250U | 1250U |
10×AM Buffer B | 0.2ml | 1.0ml |
質(zhì)量控制
經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl，200 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，0.15% Triton? X-100，pH 7.5 @ 25°C
相關產(chǎn)品
MutS蛋白（AE1182、AE1184）
應用實例
1. 錯配堿基對酶切反應/SNP檢測
1）按下表配制反應體系
反應組分 | ul |
10× Buffer | 5 |
錯配DNA | 1ug |
T7內(nèi)切核酸酶I (10U/μl) | 1-2 |
H2O | Variable |
總體積 | 50 |
2) 37°C反應30min；
3) 65℃加熱15min，或加入EDTA至總濃度為10mM，終止反應；
4) 電泳檢測DNA水解結果。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l T7 核酸內(nèi)切酶 I 是一種具有底物結構選擇性的酶。該酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物時，必須控制酶量和反應時間。
l 反應溫度超過 42℃ 時，會增加非特異性核酸酶活性。
