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產(chǎn)品說明
T4 噬菌體基因 32 編碼蛋白又稱T4 SSB蛋白，是T4 噬菌體DNA復制和修復所必需的一種單鏈DNA（ssDNA）結(jié)合蛋白。T4 SSB結(jié)合并穩(wěn)定瞬時形成的ssDNA區(qū)域，在T4噬菌體DNA 復制過程中起著重要的結(jié)構(gòu)性作用。T4 SSB也被廣泛地用于標記和穩(wěn)定ssDNA區(qū)域，以便用電子顯微鏡觀察細胞內(nèi)存在的ssDNA結(jié)構(gòu)。最新報道表明T4噬菌體基因32編碼蛋白可以提高RT-PCR中反轉(zhuǎn)錄的效率、促進限制性內(nèi)切酶的消化反應、增強T4 DNA 聚合酶的活性和提高PCR 的產(chǎn)量。
本公司T4 SSB 是重組表達，多步純化的重組蛋白，分子量約為33.5 kDa的蛋白質(zhì)。功能與天然來源的T4 SSB具有相同的應用效果。
活性定義
本品按純蛋白質(zhì)量濃度銷售。
濃度：5mg/ml
保存條件：-20℃保存
特點
? 穩(wěn)定和標記 ssDNA 結(jié)構(gòu)；
? 在 RT-PCR 過程中，增加反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力；
? PCR 時，增加目的片段的產(chǎn)量和特異性；
? 適用于所有PCR buffer、等溫核酸擴增buffer。
? 熱失活：65℃ 加熱 20 分鐘。
適用范圍
? 反轉(zhuǎn)錄反應、PCR；
? 體外轉(zhuǎn)錄；
? 其它需要結(jié)合ssDNA的實驗。
? 電鏡觀察細胞內(nèi)的DNA結(jié)構(gòu)
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1904A | AE1904B | AE1904C |
T4 SSB | 0.2mg | 1mg | 4mg |
質(zhì)量控制
相關(guān)測試表明無外源內(nèi)切、外切脫氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA。
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，0.5 mM DTT，1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 8 @ 25°C。
相關(guān)產(chǎn)品：
Taq DNA聚合酶、忠實性DNA聚合酶等各種PCR酶、Bsu DNA聚合酶（大片段）等
使用實例：
1、降低PCR的引物二聚體
1）在冰上按下表配制反應體系
反應組分 | 體積或濃度 |
10×PCR Buffer | 5ul |
T4 SSB | 1-2ul |
引物-F（10uM） | 1.5 |
引物-R（10uM） | 1.5 |
DNA template | 10-100ng |
Taq酶(5U/μl) | 0.5ul |
H2O | Y ul |
總體積 | 50ul |
2）PCR反應，
3）瓊脂糖電泳檢測擴增產(chǎn)物，或按實驗目的進行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 65℃加熱20分鐘可以完全失活。
l 反轉(zhuǎn)錄實驗應該遵守RNA操作規(guī)則，并添加RNase Inhibitor。
