產(chǎn)品說(shuō)明

本試劑盒為單片段重組克隆試劑盒的優(yōu)化版， 且為 2×Mix 形式，便于使用。可以將 DNA 片段高效插入載體的任意位點(diǎn)，克隆中不需要T4 DNA 連接酶。

重組克隆是一種簡(jiǎn)單、快速、高效的 DNA 無(wú)縫克隆技術(shù)，可將插入片段定向克隆至任意載體的任意位點(diǎn)。首先將載體線性化，通過(guò)在 PCR 引物 5'端加入線性化載體的 15-20 個(gè)堿基的末端序列，使得 PCR 產(chǎn)物 5'和 3' 末端帶有和線性化載體末端相同的序列。將該 PCR 產(chǎn)物和線性化載體按一定比例混合后，在重組酶作用下， 50°C 反應(yīng) 15-30 min 即可進(jìn)行轉(zhuǎn)化，完成定向克隆。

本公司重組克隆試劑盒基于獨(dú)特的非連接酶依賴體系，極大地降低了載體自連背景，陽(yáng)性克隆率可達(dá) 95％以上。改良的重組酶與優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，顯著提高重組效率，使得線性化載體與插入片段不進(jìn)行純化直接用于重組克隆成為可能，極大的簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟。

特點(diǎn)

◇克隆位點(diǎn)任意選擇

◇ PCR 產(chǎn)物直接克隆

◇多基因同時(shí)克隆

◇陽(yáng)性克隆率高

◇ PreMix 形式操作更方便

適用范圍

◇快速克隆

◇高通量克隆

◇無(wú)縫克隆

◇ DNA 定點(diǎn)突變

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